Новы набор для выяўлення нуклеінавых кіслот на каранавірус (SARS-Cov-2).
New Cараnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluрудаscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Pродt name 】Новы набор для выяўлення нуклеінавых кіслот на каранавірус (SARS-Cov-2) (метад люмінесцэнтнага зонда RT-PCR)
【Packaging specкаліcations 】25 Тэсты/Камплект
【Intended usўзрост】
Гэты набор выкарыстоўваецца для якаснага выяўлення нуклеінавай кіслаты новага каранавіруса ў мазках з насаглоткі, ротаглоткі (горла), мазкоў з пярэдняй носа, мазкоў з сярэдзіны насавых ракавін, прамыванняў з носа і насавых аспіратаў ад асоб, у якіх медыцынскі работнік падазрае COVID19. Выяўленне генаў ORF1ab і N новага каранавіруса можа быць выкарыстана для дапаможнай дыягностыкі і эпідэміялагічнага маніторынгу новай каранавіруснай інфекцыі.
【Principles of the pроцэdure 】
Гэты набор прызначаны для спецыяльных зондаў TaqMan і спецыфічных праймераў, распрацаваных для паслядоўнасцей гена ORF1ab і N новага каранавіруса (SARS-Cov-2). Раствор для рэакцыі ПЦР змяшчае 3 наборы спецыфічных праймераў і флуоресцентных зондаў для спецыфічнага выяўлення мішэняў, а дадатковы набор спецыфічных праймеров і флуоресцентных зондаў выкарыстоўваецца ў якасці ўнутранага стандартнага кантролю набору для выяўлення эндагенных генаў хатняга абслугоўвання.
Прынцып тэсту заключаецца ў тым, што спецыфічны флуарэсцэнтны зонд расшчапляецца і дэградуе экзануклеазнай актыўнасцю фермента Taq у рэакцыі ПЦР, так што рэпарцёрная флуоресцентная група і патушаная флуоресцентная група аддзяляюцца, так што сістэма маніторынгу флуарэсцэнцыі можа атрымаць флуоресцентный сігнал. сігналу, а затым дзякуючы эфекту ўзбагачэння ПЦР-ампліфікацыі сігнал флуарэсцэнцыі зонда дасягае зададзенага парогавага значэння - значэння Ct (парог цыклу). У выпадку адсутнасці амплікону-мішэні рэпарцёрная група зонда блізкая да групы тушэння. У гэты час адбываецца флуарэсцэнтны рэзанансны перанос энергіі, і флуарэсцэнцыя рэпарцёрнай групы гасіцца групай тушэння, так што флуарэсцэнтны сігнал не можа быць выяўлены прыборам для флуоресцентной ПЦР.
Каб кантраляваць выкарыстанне рэагентаў падчас тэсту, набор абсталяваны станоўчым і адмоўным кантролем: станоўчы кантроль змяшчае рэкамбінантную плазміду мэтавага сайта, а адмоўны кантроль - дыстыляваная вада, якая выкарыстоўваецца для кантролю забруджвання навакольнага асяроддзя. Рэкамендуецца пры правядзенні тэсту адначасова ставіць станоўчы і адмоўны кантроль.
【Main comпоненts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Кампанэнтаў | |
| імяe | спеціфікацыя | Колькасцьнасць | Колькасцьнасць | |
| Станоўчы кантроль | 180 мкл/флакон | 1 | 1 | Штучна сканструяваныя плазміды, дыстыляваная вада |
| Адмоўны кантроль | 180 мкл/флакон | 1 | 1 | Дыстыляваная вада |
| Сумесь SARS-Cov-2 | 358,5 мкл/флакон | 1 | / | Канкрэтныя пары праймераў, спецыфічныя флуоресцентные зонды для выяўлення, dNTP, MgCl2, KCl, Tris-HCl, дыстыляваная вада і г.д. |
| Сумесь ферментаў | 16,5 мкл/флакон | 1 | / | Ферменты Taq, зваротная транскрыптаза, ферменты UNG і інш. |
| Сумесь SARS-Cov-2 (ліяфілізаваная) | 25 тэстаў / флакон | / | 1 | Спецыфічныя пары праймераў, спецыфічныя флуоресцентные зонды для выяўлення, dNTP, ферменты Taq, зваротная транскрыптаза, дыстыляваная вада і г.д. |
| 2x буфер | 375 мкл/флакон | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, дыстыляваная вада і г.д. |
Заўвага:(1) Кампаненты ў розных пакетных наборах нельга змешваць або ўзаемазамяняць.
(2) Прыгатуйце свой уласны рэагент: набор для экстракцыі нуклеінавых кіслот.
【Storage conditions і expiration date 】
For BST-SARS-25:Транспартаваць і захоўваць пры -20±5℃ на працягу доўгага часу.
For BST-SARS-DR-25:Транспартаваць пры пакаёвай тэмпературы. Захоўваць пры -20±5℃ на працягу доўгага часу.
Пазбягайце паўторных цыклаў замарожвання-адтавання. Арыенціровачна тэрмін дзеяння 12 месяцаў.
Дату вырабу і выкарыстання глядзіце на этыкетцы.
Пасля першага адкрыцця рэагент можна захоўваць пры тэмпературы -20±5 °C не больш за 1 месяц або да канца перыяду захоўвання рэагентаў, у залежнасці ад таго, якая дата наступіць раней, каб пазбегнуць паўторных цыклаў замарожвання-адтавання і колькасці замарожванняў рэагентаў. -цыклы адтавання не павінны перавышаць 6 разоў.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1. Прыдатны тып пробы: экстрагаваны раствор нуклеінавай кіслаты.
2. Захоўванне і транспарціроўка ўзораў: захоўваць пры -20±5 ℃ на працягу 6 месяцаў. Замарожваць і размарожваць узоры не больш за 6 разоў.
【Tэстing metход】
1.Nucleic acid extraction
Абярыце прыдатны набор для экстракцыі нуклеінавых кіслот віруса і выконвайце інструкцыі адпаведнага набору. Рэкамендуецца выкарыстоўваць набор для экстракцыі і ачысткі нуклеінавых кіслот вытворчасці Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. або эквівалентны набор для ачысткі нуклеінавых кіслот.
2. Rкожныtion узростnt prepараtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Выдаліце сумесь SARS-Cov-2 і сумесь ферментаў, цалкам расплавіце пры пакаёвай тэмпературы, старанна змяшайце з дапамогай прылады Vortex, а затым ненадоўга адцэнтрыфугуйце.
(2) 16,5 мкл сумесі ферментаў дадалі да 358,5 мкл сумесі SARS-Cov-2 і старанна змяшалі, каб атрымаць змешаны рэакцыйны раствор.
(3) Падрыхтуйце чыстую восьмерычную прабірку для ПЦР аб'ёмам 0,2 мл і пазначце ў ёй 15 мкл вышэйзгаданага змешанага рэакцыйнага раствора на лунку.
(4) Дадайце 15 мкл вычышчанага раствора нуклеінавай кіслаты, станоўчага кантролю і адмоўнага кантролю і асцярожна накрыйце каўпачок прабіркі.
(5) Добра змяшайце, перавярнуўшы ўверх дном, і хутка адцэнтрыфугуйце, каб канцэнтраваць вадкасць на дне прабіркі.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Дадайце 375 мкл 2x буфера ў сумесь SARS-Cov-2((ліяфілізаваную), каб прыгатаваць рэакцыйную сумесь. Старанна змяшайце піпеткай, а потым ненадоўга адцэнтрыфугуйце. （Пасля падрыхтоўкі рэакцыйнай сумесі рэкамендуецца захоўваць яе пры -20℃ пры доўгатэрміновае захоўванне.)
(2) Падрыхтуйце чыстую восьмерычную прабірку для ПЦР аб'ёмам 0,2 мл і пазначце ў ёй 15 мкл рэакцыйнай сумесі на лунку.
(3) Дадайце 15 мкл вычышчанага раствора нуклеінавай кіслаты, станоўчага кантролю і адмоўнага кантролю і асцярожна накрыйце каўпачок прабіркі.
(4) Добра змяшайце, перавярнуўшы ўверх дном, і хутка адцэнтрыфугуйце, каб канцэнтраваць вадкасць на дне прабіркі.
3. ПЦР ampжыццёcation （Калі ласка, звярніцеся да інструкцыі па эксплуатацыі прыбора для налад працы.)
3. 1 Змесціце прабірку PCR 8 у камеру для ўзору флуоресцентного прыбора для ПЦР і ўсталюйце ўзор для даследавання, станоўчы кантроль і адмоўны кантроль у адпаведнасці з парадкам загрузкі.
3.2 Канал выяўлення флуарэсцэнцыі:
(1) Ген ORF1ab выбірае канал выяўлення FAM (рэпарцёр: FAM, гашэнне: няма).
(2) Ген N выбірае канал выяўлення VIC (рэпарцёр: VIC, гасільнік: няма).
(3) Ген унутранага стандарту выбірае канал выяўлення CY5 (рэпарцёр: CY5, гасільнік: няма).
(4) Пасіўная спасылка ўстаноўлена на ROX.
3.3 Настройка параметраў праграмы ПЦР:
| Крок | Тэмпература (℃) | Час | Колькасць цыклаў | |
| 1 | Рэакцыя зваротнай транскрыпцыі | 50 | 15 хв | 1 |
| 2 | Актывацыя фермента Taq | 95 | 2,5 хвіліны | 1 |
| 3 | Актывацыя фермента Taq | 93 | 10 с | 43 |
| Пашырэнне адпалу і набыццё флуарэсцэнцыі | 55 | 30 с | ||
Пасля ўстаноўкі захавайце файл і запусціце рэакцыйную праграму..
4.Results analysis
Пасля завяршэння праграмы вынікі аўтаматычна захоўваюцца, а крывая ампліфікацыі аналізуецца. Крывая ўзмацнення ўсталёўваецца на парог прыбора па змаўчанні.
【Explanation of test resuгэта 】
1. Вызначце абгрунтаванасць эксперыменту: канал станоўчага кантролю FAM, VIC павінен мець тыповую крывую ампліфікацыі, а значэнне Ct звычайна менш за 34, але можа вагацца з-за розных парогавых налад розных прыбораў. Канал адмоўнага кантролю FAM, VIC павінен быць неамплифицированным Ct. Пагаджаецца, што вышэйпералічаныя патрабаванні павінны выконвацца адначасова, у адваротным выпадку гэты тэст несапраўдны.
2. Выніковае меркаванне
| Канал FAM/VIC | Вынік суда |
| Ct＜37 | Проба дадатная |
| 37≤Ct＜40 | Крывая ампліфікацыі мае S-вобразную форму, і падазроныя ўзоры неабходна даследаваць паўторна; калі вынікі паўторнага абследавання адпавядаюць, ён ацэньваецца як станоўчы, у адваротным выпадку - адмоўны |
| Ct≥40 або адсутнасць узмацнення | Тэст узору адмоўны (або ніжэй ніжняй мяжы выяўлення набору) |
Заўвага: ( 1) Калі і канал FAM, і канал VIC станоўчыя адначасова, SARS-Cov-2 вызначаецца як станоўчы.
(2) Калі канал FAM або канал VIC станоўчы, а іншы канал адмоўны, тэст трэба паўтарыць. Калі ён у той жа час станоўчы, ён будзе ацэнены як станоўчы на SARS-Cov-2, у адваротным выпадку ён будзе ацэнены як адмоўны на SARS-Cov-2.
Спадарожныя тавары
-
Набор для выяўлення антыцелаў IgM/IgG супраць COVID-19
Набор для выяўлення антыцелаў IgM/IgG COVID-19 （Метад імунахраматаграфіі з калоідным золатам) Кіраўніцтва прадукту 【НАЗВА ПРАДУКТУ】Набор для выяўлення антыцелаў IgM/IgG COVID-19 （Метад імунахраматаграфіі з калоідным золатам) 【СПЕЦЫФІКАЦЫІ ЎПАКОВАННЯ】 1 тэст/набор, 10 тэстаў/набор 【 АНОТАЦЫЯ】 Новыя коронавирусы належаць да роду β. COVID-19 - вострае рэспіраторнае інфекцыйнае захворванне. Людзі, як правіла, успрымальныя. У цяперашні час пацыенты, заражаныя новым каранавірусам, з'яўляюцца асноўнай крыніцай...
-
Набор для экстракцыі або ачысткі нуклеінавых кіслот
Набор для экстракцыі або ачысткі нуклеінавых кіслот або захоўваць пры -20 ℃. Узор трэба транспартаваць з выкарыстаннем скручвання пры тэмпературы 0 ℃. Уводзіны Набор для экстракцыі або ачысткі нуклеінавых кіслот (метад магнітных шарыкаў) прызначаны для аўтаматызаванай ачысткі РНК і ДНК з вадкасцей арганізма (такіх як мазкі, плазма, сыроватка) з дапамогай аўтаматызаваных інструментаў для экстракцыі нуклеінавых кіслот. Тэхналогія магнітных часціц забяспечвае высакаякасную ДНК/РНК, прыдатную для ...
-
Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2 (імунахраматагр...
Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2 （Метад імунахраматаграфіі) Кіраўніцтва па прадукту 【НАЗВА ПРАДУКТУ】Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2 （Метад імунахраматаграфіі) 【СПЕЦЫФІКАЦЫІ ЎПАКОВАННЯ】 1 тэст/набор 【АНОТАЦЫЯ】 Новыя каранавірусы належаць да роду β. COVID-19 - вострае рэспіраторнае інфекцыйнае захворванне. Людзі, як правіла, успрымальныя. У цяперашні час пацыенты, заражаныя новым каранавірусам, з'яўляюцца асноўнымі...
-
Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2
Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2 (метад імунахраматаграфіі) Кіраўніцтва па прадукту 【НАЗВА ПРАДУКТУ】Набор для аналізу антыгена SARS-CoV-2 (метад імунахраматаграфіі) 【СПЕЦЫФІКАЦЫІ УПАКОВАКІ】 1 тэст/набор, 25 тэстаў/набор, 100 тэстаў/набор 【АНОТАЦЫЯ 】 The Новыя коронавирусы належаць да роду β. COVID-19 - вострае рэспіраторнае інфекцыйнае захворванне. Людзі, як правіла, успрымальныя. У цяперашні час асноўнай крыніцай заражэння з'яўляюцца пацыенты, заражаныя новым каранавірусам; бессімптомныя інфікаваныя людзі...