Набор для экстракцыі або ачысткі нуклеінавых кіслот
Nуклеінавых ACID Eвыманне Or Ачышчэнне Kitабо захоўваць пры -20 ℃. Узор трэба транспартаваць з выкарыстаннем скручвання пры тэмпературы 0 ℃.
Introduction
Набор для экстракцыі або ачысткі нуклеінавых кіслот (метад магнітных шарыкаў) прызначаны для аўтаматызаванай ачысткі РНК і ДНК з вадкасцей арганізма (такіх як мазкі, плазма, сыроватка) з дапамогай аўтаматызаваных інструментаў для экстракцыі нуклеінавых кіслот. Тэхналогія магнітных часціц забяспечвае высакаякасную ДНК/РНК, прыдатную для непасрэднага выкарыстання ў наступных праграмах, такіх як ампліфікацыя або іншыя ферментатыўныя рэакцыі.
Application Range
Узоры суцэльнай крыві, плазмы, сыроваткі і іншых тканін непасрэдна лізіруюцца і пераварваюцца. Вызваленая нуклеінавая кіслата была селектыўна адсарбавана суперпарамагнітнымі нанаметровымі магнітнымі шарыкамі. Затым бялок, іёны неарганічнай солі і арганічныя прымешкі выдалялі прамывальным растворам. Нарэшце, нуклеінавую кіслату элюіравалі элюентам, каб атрымаць чысты раствор нуклеінавай кіслаты.
Kit Contents
кот. няма | YXN-VIRAL01-32A-BR | Кампаненты | ||
-50А | - 100А | |||
Памер | 32Tes | 50Тэст | 100Тэст | |
Буфер для лізісу | 96 wellПапярэдняя ўпакоўка ed Талеркі 2 штукі | 25 мл | 50 мл | ПАВ і трис |
Прамывальны буфер I | ★15 мл | ★30 мл | Раствор з высокім утрыманнем соляў | |
Прамывальны буфер Іл | ★6 мл*2 | ★12 мл*2 | Слабосолевой раствор | |
Буфер для элюцыі | 10 мл | 20 мл | Слабосолевой раствор | |
Рэагент MagaBio | 1,0 мл | 2,0 мл | Магнітныя часціцы | |
Даведнік (=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nнататкі:ДляYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,дадайце 15 мл абсалютнага этанолу ў ★15 мл прамывальнага буфера I перад выкарыстаннем; перад выкарыстаннем дадайце 24 мл абсалютнага этанолу ў ★6 мл прамывальнага буфера Il. | ||||
ДляYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, дадайце 30 мл абсалютнага этанолу ў ★30 мл прамывальнага буфера I перад выкарыстаннем; дадайце 48 мл абсалютнага этанолу да ★12 мл прамывальнага буфера Il перад выкарыстаннем.【Рэагенты, якія павінен падрыхтаваць карыстальнік】Калі ласка, прыгатуйце абсалютны этанол (ступені для аналізу) самастойна. |
Stаранжавы Conditions
Пасля прыбыцця набору кампаненты набору можна захоўваць пры пакаёвай тэмпературы (15 - 25°C). Рэагенты стабільныя на працягу аднаго года з даты вырабу.
Sample Requirements
1. Ужывальны ўзор: мазкі, плазма, сыроватка і суцэльная кроў і г.д.
2. Захоўванне і транспарціроўка ўзору: узор павінен быць правераны неадкладна
Materials і Devices Required but Not Pроўided
1. Аднаразовыя неопудренные пальчаткі
2. Біялагічны кантэйнер
3. Аловак або пер
Procedure
Ніжэй у якасці прыкладу выкарыстоўваецца ласьён для тампона для экстракцыі ўзору палоскі, каб коратка растлумачыць этапы працы рэагента для экстракцыі на прыборы для біялагічнай экстракцыі нуклеінавых кіслотBioer NPA-32ПабоSMМАСТАЦТВА 32. Для іншых тыпаў узораў, калі ласка, звярніцеся да кіраўніцтва карыстальніка. Ён таксама можа выкарыстоўвацца кліентамі ў адпаведнасці з эксперыментальнымі набыткамі:
1. Рэагент Падрыхтоўка
а. ДляYXN-VВ03-32А-50А і YXN-VB03-32A-100A
Дадайце 500 мкл лізіснага буфера ў слупкі 1 і 7 2,2 мл пласціны з 96 глыбокімі лункамі, 500 мкл прамывальнага буфера I у слупкі 2 і 8, 500 мкл прамывальнага буфера II у слупкі 3, 4 і 9,10; 70 мкл буфера для элюіравання ў калонку 5 і 11, 180 мкл чыстай вады і 20 мкл рэагента MagaBio у калонку 6 і 12 (магнітныя шарыкі трэба старанна перамяшаць перад выкарыстаннем),
б. ДляYXN-VB03-32A
Пастаўце загадзя спакаваныя рэагенты з 96 лункамі пры пакаёвай тэмпературы. Патрасіце 96-лункавы пласціну ўверх дном тры разы і адарвіце поліэтыленавы пакет. Адцэнтрыфугуйце папярэдне спакаваны рэагент на працягу некалькіх секунд (або некалькі разоў узмахніце рукой), каб пазбегнуць прыліпання рэагента да сценкі прабірак. Адарвіце плёнку алюмініевай фальгі з 96-лункавага пласціны і вызначце кірунак пласціны (магнітныя шарыкі ў калонцы №6 і №12),
2.Узор Здабыча
1. Дадайце 300 мкл ўзору ў калонкі 96-лункавага планшэта № 1 і № 7, пазбягайце перакрыжаванага забруджвання,
2. Змесціце ў прыбор пласціну з 96 лункамі, усталюйце наканечнікі з 8 палосак на прыбор,
3. Запусціце праграму ў адпаведнасці з наступнымі працэдурамі,
4. Пасля завяршэння аўтаматычнай ачысткі перанясіце буфер для элюіравання ў калонках 5 і 11 у чыстую антыядзерную цэнтрыфужную прабірку на 0,5 мл; калі вы не выкарыстоўваеце яго адразу, захоўвайце пры -20 °C.
Performance Characteristics
1. Экстрагаваны прадукт выяўляецца з дапамогай высокачуллівага рэагента для выяўлення ДНК HBV для дасягнення адчувальнасці 10 МЕ/мл. Экстрагаваны прадукт выяўляецца з дапамогай высокаадчувальнага рэагента для выяўлення РНК ВГС для дасягнення адчувальнасці 50 МЕ/мл.
2. Выберыце 4 пробы (узор сыроваткі/плазмы, узор мазка з насаглоткі, узор адслойвання клетак шыйкі маткі), кожны ўзор разводзяць у 10 разоў з 3 градыентамі (уключаючы 4 канцэнтрацыі зыходнага ўзору), выкарыстоўваючы кваліфікаваныя рэагенты і тэсты для выяўлення ўнутраных эталоннага гена ў адпаведнасці з інструкцыямі да прадукту, а значэнне Ct кожнай партыі адрозніваецца менш чым на 1.
Step | добра Размяшчэнне | Prпраграма Імя | Waiting Time(min:SS) | Mixінж Time(mу:SS) | Magnet Time(min:SS) | Aдсорбцыі | Sпамачыўся | Vолум татус (мкл) | Tтэмпература |
1 | 1 | Lyсястра | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wпопел1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wпопел2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wпопел3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Элюцыя | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Адкідаць | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. ГЕНЕРAL БЯСПЕКА.
Выкарыстанне гэтага прадукта спосабам, не пазначаным у карыстальніцкай дакументацыі, можа прывесці да траўмаў або пашкоджання прыбора або прылады. Пераканайцеся, што кожны, хто выкарыстоўвае гэты прадукт, атрымаў інструкцыі па агульных правілах бяспекі для лабараторый і інфармацыю аб бяспецы, прадстаўленую ў гэтым дакуменце.
1.1 Перад выкарыстаннем прыбора або прылады прачытайце і зразумейце інфармацыю аб бяспецы, прадстаўленую ў карыстальніцкай дакументацыі ад вытворцы прыбора або прылады.
1.2 Перш чым працаваць з хімікатамі, прачытайце і зразумейце ўсе адпаведныя пашпарты бяспекі (SDS) і выкарыстоўвайце адпаведныя сродкі індывідуальнай абароны (пальчаткі, халаты, сродкі абароны вачэй і г.д.). Каб атрымаць пашпарты бяспекі, глядзіце раздзел «Дакументацыя і падтрымка» гэтага дакумента.
2. Хімічны бяспекі
АГУЛЬНАЯ ХІМІЧНАЯ РАБОТА. Каб звесці да мінімуму небяспеку, пераканайцеся, што персанал лабараторыі прачытаў і выконваў агульныя рэкамендацыі па бяспецы пры выкарыстанні, захоўванні і ўтылізацыі хімікатаў, прыведзеныя ніжэй, і пракансультуйцеся з адпаведным SDS для атрымання канкрэтных мер засцярогі і інструкцый: Прачытайце і зразумейце пашпарты бяспекі (SDS), прадстаўленыя хімічным рэчывам. вытворца, перш чым захоўваць, апрацоўваць або працаваць з хімічнымі рэчывамі або небяспечнымі матэрыяламі.
2.1 Звядзіце да мінімуму кантакт з хімікатамі. Апранайце адпаведныя сродкі індывідуальнай абароны пры працы з хімікатамі (напрыклад, ахоўныя акуляры, пальчаткі або ахоўную вопратку).
2.2 Звядзіце да мінімуму ўдыханне хімічных рэчываў. Не пакідайце ёмістасці з хімікатамі адкрытымі. Выкарыстоўваць толькі пры дастатковай вентыляцыі (напрыклад, выцяжной шафе).
2.3 Рэгулярна правярайце хімікаты на прадмет уцечак або разліваў. У выпадку ўцечкі або разліву прытрымлівайцеся працэдур ачысткі вытворцы, рэкамендаваных у SDS.
2.4 Апрацоўвайце хімічныя адходы ў выцяжной шафе.
2.5 Забяспечыць выкарыстанне кантэйнераў для першаснага і другаснага смецця. (Асноўныя адходы
кантэйнер змяшчае непасрэдныя адходы. Другасны кантэйнер змяшчае разлівы або ўцечкі з асноўнага кантэйнера. Абодва кантэйнеры павінны быць сумяшчальныя з адходамі і адпавядаць федэральным, дзяржаўным і мясцовым патрабаванням да захоўвання кантэйнераў.).
2.6 Пасля апаражнення смеццевага кантэйнера зачыніце яго вечкам, які ўваходзіць у камплект.
2.7 Ахарактарызуйце (пры неабходнасці шляхам аналізу) адходы, якія ўтвараюцца ў выніку канкрэтных прымянення, рэагентаў і субстратаў, якія выкарыстоўваюцца ў вашай лабараторыі.
2.8 Пераканайцеся, што адходы захоўваюцца, перамяшчаюцца, транспартуюцца і ўтылізуюцца ў адпаведнасці з усімі мясцовымі, дзяржаўнымі/правінцыйнымі і/або нацыянальнымі правіламі.
2.9 Радыеактыўныя або біянебяспечныя матэрыялы могуць патрабаваць асаблівага абыходжання, і могуць прымяняцца абмежаванні на ўтылізацыю.
3.Біялагічны небяспека бяспекі
Патэнцыйная біялагічная небяспека. У залежнасці ад узораў, якія выкарыстоўваюцца на гэтым прыборы, паверхню можна лічыць біялагічна небяспечнай. Пры працы з біялагічнымі рэчывамі выкарыстоўвайце адпаведныя метады дэзактывацыі.
БІЯНЕБЯСПЕКА. Біялагічныя ўзоры, такія як тканіны, біялагічныя вадкасці, інфекцыйныя агенты і кроў людзей і іншых жывёл, могуць перадаваць інфекцыйныя захворванні. Выконвайце ўсе адпаведныя мясцовыя, дзяржаўныя/правінцыйныя і/ці нацыянальныя правілы. Апранайце адпаведнае ахоўнае абсталяванне, якое ўключае, але не абмяжоўваецца імі: ахоўныя акуляры, шчыток для твару, адзенне/лабараторны халат і пальчаткі. Усе работы павінны праводзіцца ў належным чынам абсталяваных памяшканнях з выкарыстаннем адпаведнага абсталявання бяспекі (напрыклад, прылад фізічнага ўтрымання). Асобы павінны прайсці навучанне ў адпаведнасці з дзеючымі нарматыўнымі патрабаваннямі і патрабаваннямі кампаніі/установы, перш чым працаваць з патэнцыяльна інфекцыйнымі матэрыяламі.
Прачытайце і прытрымлівайцеся адпаведных рэкамендацый і/або нарматыўных патрабаванняў у наступным:
У ЗША: рэкамендацыі Міністэрства аховы здароўя і сацыяльных службаў ЗША апублікаваны ў часопісе «Біябяспека ў мікрабіялагічных і біямедыцынскіх лабараторыях», які можна знайсці па адрасе: www.cdc.gov/biosafety.
Стандарты бяспекі і гігіены працы, узбуджальнікі крыві (29 CFR§1910.1030), размешчаны па адрасе:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Пратаколы праграмы біябяспекі вашай кампаніі/установы для працы з патэнцыяльна інфекцыйнымі матэрыяламі/абыходжання з імі. Дадатковую інфармацыю аб рэкамендацыях па біялагічнай небяспецы можна знайсці на сайце: www.cdc.gov.
У ЕС: азнаёмцеся з мясцовымі рэкамендацыямі і заканадаўствам аб біялагічных небяспеках і мерах біябяспекі і звярніцеся да лепшай практыкі, апублікаванай у Кіраўніцтве па лабараторнай біябяспецы Сусветнай арганізацыі аховы здароўя (СААЗ), трэцяе выданне, якое можна знайсці па адрасе: www.who.int/csr/resources/publications /біябяспека/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/.